直接化学发光

化学发光剂直接标记到抗体或抗原的免疫测定方法称为化学发光免疫分析。直接化学发光剂在发光免疫分析过程中不需要酶的催化作用，直接参与发光反应，他们在化学结构上有产生发光的特有基团，可直接标记抗原或抗体，目前常见的直接化学发光标记物主要有吖啶酯和异鲁米诺。
直接化学发光速度快，试剂稳定性好，但灵敏度略低于酶促发光。

酶促化学发光

酶促化学发光免疫分析是以酶标记抗原或抗体进行免疫反应，反应复合物上的酶再作用于发光底物，在信号试剂作用下发光，用发光信号测试仪进行发光测定，酶的浓度决定了化学发光的强度。HRP与ALP为常用的标记酶，放光底物分别为鲁米诺，AMPPD等。

电化学发光

在电极上施加一定的电压或电流时，在点击电化学反应产物之间及点击反应产物与溶液中的某组分发生化学反应激发态，当激发态跃迁回基态时放出能量，此过程称之为电化学发光（ECL）.该方法学主要的电化学发光剂三联吡啶钌。

三种化学发光方法的比较：