硝酸纤维素膜（NC）的选择

如何将捕获分子持续、牢固的结合在检测线T和质控线C，是生产一个灵敏、可靠的免疫层析检测试剂的关键。同时，POCT厂商还可以结合自己的生产工艺对其性能(如灵敏度、特异性等)进行确认，从而选择一款满足实际生产需求的NC膜。

通常在研发过程中会从以下几个方面来选择合适的膜：

● 厚度：可采用测厚仪进行测量，在NC膜上选择几个点进行测量以考察其均匀性。厚度若不均匀，会导致划出来的C/T线宽窄不一。在捕获试剂用量不变的情况下，膜越厚C/T线越窄，反之亦然。
● 宽度：可采用普通直尺或游标卡尺测量。常用的幅宽有20mm和25mm两种规格，厂家可根据实际生产工艺的需求定制特殊的规格。
● 背衬：NC膜有无背衬和带背衬两种类型。由于材质本身特性，无背衬NC膜很脆，容易破裂。背衬的存在不但提高了NC膜强度，易于生产过程中的加工操作；同时，在其粘贴到PVC胶板后，背衬可以有效地阻隔胶内物质迁移进入NC膜，避免对性能造成影响。
● 爬速（膜孔径）： 目前，行业内统一采用爬速测试的方法来表征侧向流动方向的膜孔径。爬速可以用秒表测定纯化水从膜的底部通过毛细作用"爬"到4cm顶端所用的时间（s）得到。根据爬速的不同，NC膜一般可分为快流速、中流速和慢流速三类。流速越快，意味着孔径越大。
● 蛋白吸附：目前普遍认同的是，NC膜与蛋白的结合是彼此之间疏水作用力、氢键以及静电吸力三者共同作用的结果。蛋白与膜结合能力的强弱将直接影响检测灵敏度和C/T线的宽度。

一般来说，影响NC膜和蛋白结合的因素包括：

1）制膜材料本身的性质：不同厂家生产的NC膜虽然都是由硝酸纤维素制成，但是不同原材料在性能上存在一定差异，会导致与蛋白的结合能力有不所同。
2）比表面积：比表面积越大，意味着膜内聚合物表面积越大，可与蛋白进行结合位点越多，蛋白结合能力越强。
3) 表面活性剂的含量：表面活性剂对NC膜起到润湿的作用，但是浓度过高则可能会影响NC膜与蛋白的结合。

抗体对的优化
尽管试纸条的物理成分、构建技术和缓冲剂在优化测试中起着主要作用，但抗体对的选择仍是整个工艺的核心，需要精心筛选以确保抗体的亲和力，特异性及稳定性。由于单克隆抗体（大多来自于小鼠杂交瘤）的产量高，稳定性好，在体外诊断试剂的开发中广受科学家的追捧。

纳米粒子的选择

在选择纳米粒子时，首先要确定开发的诊断试剂的目标，定性或定量检测，多联检或单指标检测，以最终确定使用胶体金，乳胶微球抑或量子点，荧光微球等材料。当然，除此之外，还需要考虑所选的材料是否具备如下特点:

● 在各种条件和温度下溶液中的胶体稳定性；
● 在一个大的（和有用的）动态范围内的检测灵敏度；
● 共轭的效率和可重复性（不损失化学和生物的完整性和活性）；
● 缺乏或非常低的非特异性结合特性（确保高信噪比）；
● 合适成本以实现商业化；